+7 (495) 220 94 85
84997046244@bga.su

Выделение геномной ДНК из рисовых листьев с использованием высокоскоростных микроцентрифуг himac CF15RN/CF16RN производства Eppendorf AG

Выделение геномной ДНК из рисовых листьев с использованием высокоскоростных микроцентрифуг himac CF15RN/CF16RN производства Eppendorf AG
(0)
Задать вопрос Добавить к заказу

В этом эксперименте рассматривается получение геномной ДНК из рисовых листьев с использованием напольных высокоскоростных центрифуг himac CF15RN/CF16RN и угловых роторов T15A45/T15A46. Выделение геномной ДНК с помощью высокоскоростных микроцентрифуг – простой, быстрый и экономичный метод получения чистых образцов.

Оборудование

Центрифуга: напольная высокоскоростная микроцентрифуга himac CF15RN или CF16RN

Ротор: угловой ротор T15A45 (пробирки 5 мл х 12) или T15A46 (пробирки Eppendorf 5 мл х 12)

Описание эксперимента

Измельчите 0,3 г рисового листа и поместите полученный образец в 5 мл пробирку

В каждую пробирку добавьте по 0,8 мл 1,5 х цетилтриметиламмоний бромидного экстрактного буфера

Инкубируйте при комнатной температуре в течение 10 минут

Добавьте 0,8 мл хлороформа и перемешайте

Инкубируйте при комнатной температуре в течение 30 минут

Центрифугируйте при 10 000 х g и температуре +20 °С в течение 10 минут

Перенесите верхнюю фракцию в новую 5 мл пробирку

Добавьте 0,8 мл буфера для осаждения и перемешайте с помощью пипетки

Инкубируйте при температуре +55 °С в течение 30 минут

Центрифугируйте при 10 000 х g и температуре +20 °С в течение 10 минут

Удалите супернатант

Добавьте 0,8 мл одномолярного раствора NaCl-TE и ресуспендируйте

Инкубация образца при температуре +55 °С в течение 2-х часов

Центрифугируйте при 10 000 х g и температуре +20 °С в течение 10 минут

Переместите супернатант (около 0,8 мл) в новую 5 мл пробирку

Добавьте 0,8 мл изопропилового спирта и хорошо перемешайте

Центрифугируйте при 10 000 х g и температуре +20 °С в течение 10 минут

Удалите супернатант

Добавьте 1,5 мл 70%-ного этанола

Центрифугируйте при 10 000 х g и температуре +20 °С в течение 5 минут

Удалите супернатант

Центрифугируйте при 10 000 х g и температуре +20 °С в течение 2 минут

Удалите весь супернатант с помощью автоматической пипетки и высушите

Добавьте 100 мкл TE буфера и полностью растворите осадок с помощью вортекса

Перенесите полученный образец ДНК в 1,5 мл пробирку и храните при -20°С.

Отзывы

Оставьте первый отзыв

Добавить отзыв

Добавить отзыв