Термоциклеры / амплификаторы
Термоциклеры / Амплификаторы предназначены для проведения полимеразной циклической реакции (ПЦР) копируемого участка дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) или рибонуклеиновой кислоты (РНК) через комплементарную к-ДНК. Классический вариант этого молекулярно-генетического метода предусматривает оценку продукта ПЦР при помощи гель-электрофореза. Применение термоциклеров с системой флуоресцентной детекции позволяет сразу оценивать прохождение амплификации в режиме реального времени без проведения трудоемких электрофоретических процедур.
При выборе модели термоциклера (амплификатора) необходимо в первую очередь учитывать следующий ряд параметров:
- 1. Наличие или отсутствие системы детекции флуоресценции. У амплификаторов, оборудованных флуоресцентными детекторами, основным критерием оценки их класса является количество каналов, по которым можно регистрировать прохождение амплификации ДНК в реальном времени.
- 2. Материал и конструкция реакционного блока. Материалом для изготовления термоблока может служить алюминий или серебро. При использовании последнего достигается более высокая скорость нагрева/охлаждения инкубируемых образцов. Наиболее распространенным форматом размещения образцов в термоблоке является 96-луночный микропланшет. Гораздо реже используют микропланшет на 384 лунки. При небольшой загруженности лаборатории в темоблоке инкубируют 8-луночные стрипы или отдельные микропробирки.
- 3. Возможность создания температурного градиента в реакционных лунках. Наличие градиентного блока позволяет существенно ускорить подбор оптимальной температуры отжига амплифицируемой последовательности ДНК. Еще более эффективным является применение 2D-градиентного блока, обеспечивающего одновременный подбор оптимальных температур денатурации и отжига при проведении ПЦР.
- 4. Функция нагрева крышки термоциклера для устранения испарения и конденсации реакционной смеси в верхней части инкубируемой лунки.
- 5. Возможность функционирования амплификатора в единой системе приборов, используемых при проведении рутинных генетических исследований, в т. ч.: станции выделения нуклеиновых кислот, секвенатора и пр.
Области применения термоциклеров/амплификаторов
Научные исследования
- Изучение генетического полиморфизма и филогенетического родства между видами;
- эволюционная генетика и палеогеномика;
- создание библиотек генов для генетической инженерии и секвенирования ДНК;
Клиническая медицина
- Диагностика инфекционных и наследственных заболеваний;
- выявление точечных мутаций в онкологии;
- генотипирование новорожденных и создание генетических паспортов;
- оценка генетической предрасположенности к непереносимости лекарственных средств;
- тестирование микро РНК.
Судебная медицина и криминалистика
- Идентификация личности;
- установление отцовства.
Пищевая промышленность
- Выявление ГМО и возбудителей опасных болезней в пищевом сырье и продуктах питания;
- подтверждение видовой генетической идентичности поставляемой мясной продукции;
- контроль соблюдения санитарно- гигиенических правил и норм на пищевых производствах.
Сельское хозяйство
- Селекция и семеноводство;
- карантин и защита растений;
- контроль качества сельскохозяйственной продукции;
- диагностика инфекционных заболеваний животных;
- племенное животноводство.
Mastercycler® X40 и Mastercycler® X50, Eppendorf (Германия) являются одними их самых быстрых и надежных амплификаторов в мире.. Запатентованная технология термоциклирования обеспечивает высокую точность и скорость нагрева и охлаждения микропланшетов (до 10 °C в сек.). Установленные в этих моделях элементы Пельтье позволяют создавать несколько зон обширных градиентов на одном микропланшете.
Термоциклеры компании Tian Long представлены широким модельным рядом от классической модели Genesy с градиентным блоком до амплификвторов в реальном времени разной производительности (Getier 96E, Gentier X3 и др.). Все модели, производимые этой компанией, обеспечивают высокую скорость прохождения ПЦР, точность поддержания заданного температурного режима и воспроизводимость результатов. Простота и дружественный интерфейс программного обеспечения позволяют быстро и качественно проводить самые разные виды ПЦР-анализа: исследование однонуклеотидного полиморфизма (SNP), TD-PCR, Long-PCR и пр.
ДНК-амплификаторы Azure Cielo производства Azure Biosystems (США)– новейшие системы для амплификации ДНК в реальном времени. Возможность решения широкого спектра задач, удобный интерфейс, различные варианты подключения, высококачественный термоблок, оптоволоконный детектор, возможность использования пользовательских красителей – неоспоримые преимущества амплификаторов Azure Biosystems.