В НАЛИЧИЕ НА СКЛАДЕ КАТАЛОГ


Выделение митохондрий на высокоскоростной рефрижераторной центрифуге himac CR22N производства Koki Holdings (Япония)


Митохондрии - внутриклеточные органеллы большинства эукариотических клеток, имеющие собственную ДНК. Митохондрии – энергетические станции клеток. Метод дифференцированного центрифугирования для исследования субклеточных структур, в частности митохондрий, разработал доктор Альбер Клод, получивший Нобелевскую премию по физиологии и медицине в 1974 году.

В данном эксперименте рассматривалось выделение митохондрий из клеток печени крыс методом центрифугирования. В процессе выделения использовались новые бакеты уникальной формы, бакетный ротор R8S, который можно применять для высокоскоростного центрифугирования с охлаждением при ускорении 11 500 х g и конические пробирки объёмом 50 мл.

Оборудование

Центрифуга: высокоскоростная центрифуга с охлаждением CR22N

Ротор: бакетный ротор R8S (на 4 пробирки)

Пробирки: 50 мл пробирки с коническим дном

Описание эксперимента

Приготовьте 10% гомогенат печени крыс (количество ткани: от 10 до 20 г)

Центрифугируйте при скорости 1 800 об/мин, ускорении 600 х g, в течение 10 минут, при +4°С, режимы ускорения/торможения – 9/9

Перенесите супернатант в 50 мл коническую пробирку

Центрифугируйте при скорости 5 600 об/мин, ускорении 5500 х g, в течение 20 минут, при +4°С, режимы ускорения/торможения – 9/9

Слейте супернатант. При декантации слегка встряхните пробирку несколько раз, чтобы избавиться от красно-коричневой липосомной фракции в верхней части осадка. Добавьте необходимое количество 0.25-тимолярного раствора сахарозы в желто-коричневый осадок митохондрий и снова центрифугируйте при скорости 5 800 об/мин, ускорении 6000 х g, в течение 15 минут, при +4°С, режимы ускорения/торможения – 9/9

Чем больше раз повторять вышеописанную операцию, тем выше степень чистоты выделенных митохондрий, однако при повторах снижается их активность, поэтому рекомендуется повторять вышеописанную операцию не более двух раз.

Осадок: фракция митохондрий

Количество митохондрий, полученных по описанной выше методике эквивалентно содержанию белка от 15 до 30 мг на грамм печени крысы.



Связаться с нами / оформить заказ

Ваше имя *
Организация *
Контактный телефон
Контактный E-mail *
Интересующий продукт *
Сообщение
пожалуйста, заполните все поля со *

CAPTCHA Подтвердите, пожалуйста, что Вы человек:

При отправке заявки вы соглашаетесь на использование ваших персональных данных