В НАЛИЧИЕ НА СКЛАДЕ КАТАЛОГ


Выделение РНК из растительной ткани с использованием настольных высокоскоростных микроцентрифуг himac CT15E/CT15RE производства Hitachi Koki (Япония)


В этом эксперименте рассматривается получение высококачественной РНК из растительной ткани с использованием набора RNeasy Plant Mini Kit (QIAGEN) на микроцентрифугах himac CT15E или CT15RE при использовании угловых роторов T15A61/T15A62. Метод выделения РНК со стадией центрифугирования – простой и эффективный метод получения чистых образцов.

Оборудование

Центрифуга: настольная высокоскоростная микроцентрифуга CT15E или CT15RE

Ротор: угловой ротор T15A61 (2мл/1.5мл х 24 пробирки) или угловой ротор T15A62 (2мл/1.5 x 24 пробирки или 0.5 мл пробирки x 24)

Набор для выделения: RNeasy Mini Kit (QIAGEN)

Описание эксперимента

С помощью жидкого азота измельчите растительную ткань в мелкий порошок пестиком в ступке

Поместите порошок в 2 мл микропробирку

Добавьте 450 мкл буфера RLT в пробирку и встряхните

Инкубируйте при температуре +56 °С в течение 1-3 минут

Вставьте QIAshredder spin колонки в новые 2 мл микропробирки, предварительно отрезав крышки. Осторожно перенесите полученный клеточный лизат в QIAshredder спин колонки.

Центрифугируйте при 15 000 об/мин (21 500 х g) в течение 2 минут при комнатной температуре

Переместите фильтрат в новые 2 мл микропробирки

Добавьте 0,5 объема (или больше) 96%-ного этанола в пробирку и перемешайте осторожно пипеткой

Вставьте RNeasy spin колонку в новую 2 мл микропробирку, предварительно отрезав ее крышку. Поместите 650 мкл полученного раствора в RNeasy спин колонку.

Центрифугируйте при 9 200 об/мин (8 000 х g) в течение 15 секунд при комнатной температуре

Удалите фильтрат

Добавьте 700 мкл буфера RW1 в RNeasy spin колонку

Центрифугируйте при 9 200 об/мин (8 000 х g) в течение 15 секунд при комнатной температуре

Удалите фильтрат

Добавьте 500 мкл буфера RPE в RNeasy spin колонку

Центрифугируйте при 9 200 об/мин (8 000 х g) в течение 15 секунд при комнатной температуре

Удалите фильтрат

Добавьте 500 мкл буфера RPE в RNeasy spin колонку

Центрифугируйте при 9 200 об/мин (8 000 х g) в течение 2 минут при комнатной температуре

Поместите RNeasy spin колонку, использованную в описанной выше процедуре, в новую 1,5 мл микропробирку, предварительно отрезав ее крышку.

Добавьте 30-50 мкл дистиллированной воды в RNeasy spin колонку

Центрифугируйте при 9 200 об/мин (8 000 х g) в течение 1 минуты при комнатной температуре

Извлеките RNeasy spin колонку из пробирки. Элюат раствора РНК в пробирке следует хранить при -70 °С.

Примечание:

  1. Обязательно прочитайте инструкцию по эксплуатации ротора перед использованием.
  2. Прочитайте инструкцию по эксплуатации набора QIAGEN для детализации протокола.
  3. Не устанавливайте скорость ротора более 10 000 об/мин (12 000 х g) при использовании 1,5 мл микропробирок с открытой крышкой при +4 °С. Крышка может оторваться под действием центробежной силы.



Связаться с нами / оформить заказ

Ваше имя *
Организация *
Контактный телефон
Контактный E-mail *
Интересующий продукт *
Сообщение
пожалуйста, заполните все поля со *

CAPTCHA Подтвердите, пожалуйста, что Вы человек:

При отправке заявки вы соглашаетесь на использование ваших персональных данных